染料木黄酮对MKN45胃癌细胞及其皮下移植瘤抗血管生成作用的研究

目的：验证染料木黄酮（Genistein）对人胃癌细胞MKN45及其皮下移植瘤模型的抗血管生成作用，并建立以光学分子影像对其抗血管生成作用进行监测的实验方法。方法：MTT法检测Genistein对MKN45人胃癌细胞的增殖抑制作用；血管内皮生长因子（vascularendothelialgrowthfactor，VEGF）-ELISA验证Genistein对MKN45细胞及MKN45皮下移植瘤VEGF表达的抑制作用。免疫组化检测Genistein治疗后肿瘤VEGF、CD31及Ki67表达水平的变化；将近红外荧光染料分子Dylight680-NHS与所制备的F（ab′）2段贝伐单抗（Bevacizumab）偶联并纯化制得靶向VEGF的荧光分子探针：Dylight680-Bevacizumab-F（ab′）2，并将其应用活体荧光显像检测Genistein对肿瘤VEGF的抑制效果。结果：MTT及Ki67检测结果表明Genistein对MKN45人胃癌细胞及其皮下移植瘤无明显的增殖抑制效果（MTT检测结果中P=0.118）；VEGF-ELISA检测结果表明Genistein能够明显降低MKN45细胞（P=0.002）及其皮下移植瘤（P=0.000）VEGF的表达水平。Genistein对MKN45皮下移植瘤的治疗实验结果表明：Genistein具有一定的抑瘤疗效（P=0.034），通过免疫组化分析可知肿瘤VEGF及CD31表达水平明显降低；同时，荧光分子探针Dylight680-Bevacizumab-F（ab′）2应用于活体荧光成像能够有效地检测皮下肿瘤VEGF表达水平的变化。结论：Genistein主要通过抑制MKN45肿瘤（细胞）VEGF的表达产生抗血管生成作用而非直接抑制肿瘤（细胞）的增殖达到抑瘤效果。荧光分子探针Dylight680-Bevacizumab-F（ab′）2应用于活体显像能够对Genistein抗肿瘤血管生成的疗效进行早期预测，具有良好的临床转化前景。