沉默三联基序蛋白25基因对A549/DDP细胞株顺铂耐药性及凋亡的影响

目的：三联基序蛋白２５（tripartitemotifcontaining25，TRIM25）为泛素化E3连接酶，通过抑制TRIM25表达，研究其对肺癌顺铂（cis-dichlorodiamineplatinum，DDP）耐药细胞株A549/DDP耐药性及凋亡的影响。方法：针对TRIM25基因设计4条不同序列shRNA，分别构建重组质粒载体pt1、pt2、pt3、pt4。利用脂质体将质粒转染至A549/DDP细胞，采用real-timePCR、Westernblot检测抑制效果，MTT实验和流式细胞仪（flowcytometry，FCM）实验分别检测在DDP作用下细胞耐药性改变和凋亡情况。结果：干扰质粒pt1在mRNA和蛋白质水平上均能特异性地抑制TRIM25的表达；MTT法结果显示，抑制TRIM25表达后，干扰组pt1细胞IC50值低于pNC组（P=0.001）及对照组（P=0.000）；FCM结果显示，干扰组pt1的细胞凋亡率明显低于pNC组（P=0.005）、对照组（P=0.004）。结论：抑制TRIM25表达后，能有效地降低A549/DDP细胞株的DDP耐药性并促进其凋亡。