5-氮杂胞嘧啶核苷联合hepaCAM腺病毒通过抑制p-AKT诱导膀胱癌细胞T24凋亡

目的：研究5-氮杂胞嘧啶核苷（5-azacytidine，azac）联合肝细胞黏附分子（hepatocytecelladhesionmolecule，hepaCAM）腺病毒对膀胱癌细胞T24凋亡的影响及可能机制的探讨。方法：7种不同因素分别处理培养的膀胱癌细胞T24，hoechst33258染色检测各处理组细胞凋亡率，流式细胞仪（flowcytometry，FCM）检测细胞早期凋亡率，RT-PCR检测hepaCAM及B细胞淋巴瘤/白血病-2（Bcelllymphoma/lewkmia-2，bcl-2）mRNA的表达，Westernblot检测hepaCAM、p-AKT、total-AKT、bcl-2蛋白的表达。结果：hoechst33258显示，azac联合hepaCAM腺病毒组细胞凋亡率为（45.21±0.06）%，明显高于hepaCAM腺病毒组（15.6０±0.02）%和azac组（26.30±0.02）%，差异有统计学意义（P=0.003，P=0.008）；FCM显示，azac联合hepaCAM腺病毒组细胞早期凋亡率为（16.05±0.06）%，明显高于hepaCAM腺病毒组（3.90±0.02）%和azac组（9.67±0.02）%，差异有统计学意义（P=0.002，P=0.043）；RT-PCR显示，与单独hepaCAM腺病毒组和azac组相比，azac与hepaCAM腺病毒联用可以上调hepaCAMmRNA的表达（P=0.004，P=0.000），下调bcl-2mRNA的表达，差异有统计学意义（P=0.026，P=0.030）；Westernblot显示，与单独hepaCAM腺病毒组和azac组相比，azac联合hepaCAM腺病毒组可上调hepaCAM蛋白的表达（P=0.003，P=0.003），同时下调p-AKT（P=0.001，P=0.005）和bcl-2（P=0.000，P=0.002）蛋白的表达，差异有统计学意义。结论：azac联合hepaCAM腺病毒可能通过抑制p-AKT的磷酸化水平加速诱导T24细胞凋亡，可为膀胱癌的治疗提供新的思路。