抵抗素调节人冠状动脉内皮细胞MMP-9表达机制探讨

目的：探讨抵抗素调节冠状动脉内皮细胞中基质金属蛋白酶（matrixmetalloproteinases，MMP）－9的表达及其机制。方法：用含1%胎牛血清（fetalbovineserum，FBS）的DMEM/F12培养基培养人冠状动脉内皮细胞（humancoronaryarteryendothelialcells，HCAECs）16h（血清饥饿培养），之后随机分为6组：（1）空白对照（Con）组：无抵抗素干预；（2）Res20组：抵抗素20ng/ml干预；（3）Res40组：抵抗素40ng/ml干预；（4）Res100组：抵抗素100ng/ml干预；（5）Res40+U0126组：细胞中加入细胞外信号调节激酶（extracellularsignal-regulatedkinase，ERK）抑制剂U0126（20mmol/L）预处理1h，再加入抵抗素40ng/ml干预；（6）U0126组：细胞中仅加入ERK抑制剂U0126（20mmol/L），细胞各组干预24h后，用RT-PCR法检测MMP-9和蛋白酶抑制剂（tissueinhibitorofmetalloproteinase，TIMP）－1mRNA表达，ELISA法检测MMP-9和TIMP-1蛋白水平，Westernblot检测HCAECsp-ERK1/2及ERK1/2的蛋白表达。结果：3种浓度抵抗素干预HCAECs24h后，MMP-9mRNA与蛋白水平均较空白组明显升高（P＜0.05）；TIMP-1mRNA与蛋白水平均较空白组明显降低（P＜0.05）。40ng/ml抵抗素干预组加入ERK抑制剂U0126后，MMP-9mRNA与蛋白水平明显下降（P＜0.05），TIMP-1mRNA与蛋白无明显变化。与Con组、U0126组及Res40+U0126组相比，Res40组p-ERK1/2蛋白表达明显增高（P＜0.05）。结论：抵抗素可诱导HCAECsMMP-9的生成，可能通过下调TIMP-1的表达及激活ERK通路参与这一过程。