杆状病毒介导肝生长因子在兔骨髓间充质干细胞中的调控表达

目的：建立转染高效可调控的携带肝生长因子（hepatocytegrowthfactor，HGF）为目的基因的重组杆状病毒vAcrtTA2s-Ptight-HGF，并探寻其在转染骨髓间充质干细胞（bonemarrowmesenchymalstemcells，BM-MSCs）后的最佳诱导浓度。方法：用转基因的方法构建重组杆状病毒vAcrtTA2s-Ptight-HGF，随后转染BM-MSCs，用ELISA和Westernblot检测不同浓度强力霉素（doxycycline，DOX）诱导体外培养兔BM-MSCs分泌的HGF浓度。结果：构建了高效可调控重组杆状病毒vAcrtTA2s-Ptight-HGF，并且成功转染兔BM-MSCs，用系列浓度DOX诱导时ELISA和Westernblot均检测到BM-MSCs中HGF的表达有DOX诱导剂量依赖关系并且连续7d持续表达，且实验组的HGF的表达量明显高于对照组（P<0.001）。结论：成功构建一次性转染、高效可调控的重组杆状病毒vAcrtTA2s-Ptight-HGF，并实现对HGF表达的调控，当DOX诱导浓度为1μg/ml时为其体外最佳诱导浓度。