蛛网膜下腔出血后血管平滑肌细胞凋亡的microRNA芯片检测及分析

目的：采用microRNA芯片技术筛选蛛网膜下腔出血（subarachnoidhemorrhage，SAH）后血管平滑肌细胞（vascularsmoothmusclecell，VSMC）凋亡中起重要作用的microRNA。方法：首先建立SAH后VSMC凋亡模型。然后采用microRNA芯片筛选差异表达microRNA。最后采用qRT-PCR方法对筛选出来的microRNA145进行验证，并通过生物信息数据库预测其可能的靶基因。结果：通过200μmol/L氧合血红蛋白（oxyhemoglobin，OxyHb）作用24h，成功建立SAH后VSMC凋亡模型。MTT检测显示200μmol/LOxyHb组作用24h后吸光度（absorbance，A）值为0.197±0.131，流式细胞仪检测凋亡率为30.233±7.231，与其他组相比差异明显（P<0.05）。然后通过microRNA芯片检测，获得差异表达microRNA22个，其中显著上调的16个，显著下调的6个。其中microRNA145差异变化最大。经qRT-PCR验证，SAH后VSMC中microRNA145异常高表达。预测结果显示，Bcl-2/腺病毒E１B19０００相互作用蛋白３（Bcl-2/E1B19kDa-interactingprotein3，BNIP3）为其可能的靶基因。结论：microRNA145可能是调控SAH后VSMC凋亡的分子靶点。microRNA145可能通过BNIP3相关信号途径，导致了SAH后VSMC凋亡，诱发并加重了脑血管痉挛。