肺炎链球菌荚膜多糖加重C57BL/6小鼠中耳炎的炎症应答和中耳组织损伤

目的：研究肺炎链球菌（Streptococcuspneumoniae，S.pn）荚膜多糖（capsularpolysaccharide，CPS）对C57BL/6小鼠急性中耳炎的炎症应答和组织损伤的作用。方法：首先通过同源重组的方式构建TIGR4Δcps菌株，然后经鼓膜穿刺，分别接种5μl/耳的TIGR4和TIGR4Δcps于C57BL/6小鼠的双侧中耳腔，对照组采用相同方法接种等体积无菌磷酸盐缓冲液（phosphatebufferedsaline，PBS）。观察小鼠发病情况，分别于感染后1、3、5d制备中耳组织切片，HE染色观察中耳组织损伤及炎性细胞浸润变化，同时收集中耳灌洗液（middleearlavagefluids，MELF），检测MELF中细菌载量、炎性细胞数量和细胞因子含量。结果：成功构建了TIGR4Δcps菌株。与TIGR4组相比，TIGR4Δcps组小鼠中耳上皮的损伤更轻，中性粒细胞募集减少（第1天时P=0.004；第3天时P=0.000；第5天时P=0.000），MELF中细胞因子TNF-α和IL-6水平更低（第1天时P=0.076、P=0.000；第3天时P=0.002、P=0.003；第5天时P=0.000、P=0.000），但细菌清除更快（第1天时t=2.659，P=0.029；第3天时t=3.717，P=0.006）。结论：在S.pnTIGR4致小鼠急性中耳炎过程中，CPS具有加重炎症应答和组织损伤，并导致宿主对S.pn的清除减慢的作用。