SDF-1/HGF融合蛋白介导的大鼠间充质干细胞对造血干细胞增殖和趋化作用的影响

目的：研究基质细胞衍生因子-1（stromalcell-derivedfactor-1，SDF-1）/肝细胞生长因子（hepatocytegrowthfactor，HGF）融合蛋白介导的骨髓间充质干细胞（bonemarrowderivedstromacell，BMSCs）对造血干细胞（hematopoieticstemcell，HSC）增殖和趋化能力的影响，以期望通过联合移植的方式重建肝组织。方法：培养鉴定3~4周龄SD大鼠BMSCs及大鼠HSCs。荧光显微镜下观测重组腺病毒pAD-SDF-1-（GlySer）3-HGF-IRES-GFP感染BMSCs1、3、7、14d后的感染效率，同时ELISA检测SDF-1和HGF的表达。制备BMSCs细胞滋养层，HSCs种植于有滋养层的24孔板中，分为3组：HSCs加培养基组（A1组）；HSCs加BMSCs组（B1组）；HSCs加SDF/HGF融合蛋白介导的BMSCs组（C1组），检测共培养1、3、7、14d后HSCs的增殖倍数。利用transwell培养体系，按实验要求分为3组：HSCs加细胞培养液组（A2组）；HSCs加BMSCs组（B2组）；HSCs加SDF/HGF融合蛋白介导的BMSCs（C2组），测定HSCs的迁移指数。结果：重组腺病毒pAD-SDF-1-（GlySer）3-HGF-IRES-GFP感染BMSCs1、3、7、14d的感染效率分别为（25.28±3.72）%、（82.22±3.58）%、（64.85±4.48）%、（28.35±2.73）%，感染后第3天的感染效率最高（与第1、7、14天相比较，F=718.05，P＝0.000；F=66.80，P＝0.000；F=642.78，P＝0.000）。重组腺病毒pAD-SDF-1-（GlySer）3-HGF-IRES-GFP感染BMSCs1、3、7、14d后，SDF-1的表达分别为：（1.02±0.15）μg/ml，（4.51±0.52）μg/ml，（2.18±0.19）μg/ml，（1.22±0.21）μg/ml；HGF的表达分别为：（1.38±0.32）ug/ml，（5.01±0.43）μg/ml，（3.10±0.26）μg/ml，（1.63±0.27）μg/ml。感染后第3天SDF-1与第1、7、14天比较和HGF与第1、7、14天比较的表达明显增高（P均＝0.000）。BMSCs和HSCs共培养第3、7、14天，B1组、C1组中HSCs的扩增倍数明显高于A1组（P均＝0.000）。同时C1组中HSCs的扩增倍数明显高于B1组（P均＝0.000）。transwell显示B2、C2组的迁移指数明显高于A2组，同时C2组的迁移指数明显高于B2组。结论：SDF-1/HGF融合蛋白介导的BMSCs可能在促进HSCs的增殖及趋化方面起到重要作用。