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重庆医科大学学报 2015
姜黄素影响N2a/APP695swe细胞中ABCA1表达的机制研究Keywords: 阿尔茨海默病,钙调神经磷酸酶,三磷酸腺苷结合盒转运子A1,姜黄素,环孢素A Abstract: 目的:研究姜黄素(Curcumin)对N2a/APP695swe细胞钙调神经磷酸酶(Calcineurin,CaN)活性和三磷酸腺苷结合转运子A1(ATP-bindingcassettetransporterA1,ABCA1)表达的影响;探讨Curcumin影响N2a/APP695swe细胞中ABCA1表达的可能机制。方法:MTT法分别检测1、5、10、20、40μmol/LCurcumin或0.1、0.5、1、2、4μmol/LCaN活性抑制剂环孢素A(Cyclospo-rinA,CsA)对N2a/APP695swe细胞存活率的影响;依据MTT筛选结果,分为正常对照组、模型组、Curcumin组:5μmol/LCur-cumin处理24h的N2a/APP695swe细胞、CsA组:0.5μmol/LCsA处理48h的N2a/APP695swe细胞。酶底物显色法检测CaN活性,real-timePCR、Westernblot检测ABCA1表达水平的变化。结果:与未处理组比较,5μmol/LCurcumin组细胞存活率[(110.495±4.005)%]最高(P=0.023);0.1、0.5、1、2、4μmol/LCsA组细胞存活率依次为(105.532±4.292)%、(115.211±4.826)%、(76.317±4.475)%、(69.177±5.267)%、(54.687±3.912)%,与未处理组比较,0.5、1、2、4μmol/LCsA组差异均有统计学意义(P值依次为0.001、0.000、0.000、0.000);酶底物显色法显示与正常对照组[(18.519±1.664)nmol/mg]比较,模型组CaN活性[(24.488±3.041)nmol/mg]增加(P=0.007),Curcumin组[(16.717±2.055)nmol/mg]、CsA组[(4.928±1.232)nmol/mg]CaN活性明显受到抑制(P值依次为0.002、0.000);real-timePCR和Westernblot显示Curcumin组ABCA1表达量(real-timePCR:1.988±0.355;West-ernblot:0.294±0.015)高于模型组(real-timePCR:1.000±0.000;Westernblot:0.175±0.008),差异有统计学意义(real-timePCR:P=0.009;Westernblot:P=0.000);与模型组比较,CsA组(real-timePCR:4.000±0.464;Westernblot:0.470±0.016)的ABCA1表达水平增加(real-timePCR:P=0.000;Westernblot:P=0.000)。结论:Curcumin能上调N2a/APP695swe细胞中ABCA1的表达,其机理可能与抑制CaN活性有关。
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