|
重庆医科大学学报 2015
内参基因GAPDH和β-actin在BMP9诱导的骨髓间充质干细胞成骨分化过程中的表达情况Keywords: 内参基因,骨髓间充质干细胞,成骨分化,骨形态发生蛋白9 Abstract: 目的:观察常用内参基因甘油醛-3-磷酸脱氢酶(glceraldehyde-3-phosphatedehydrogenase,GAPDH)和β肌动蛋白(β-actin)在骨形态发生蛋白9(bonemorphogeneticproteins9,BMP9)诱导的骨髓间充质干细胞(mesenchymalstemcells,MSCs)成骨分化过程中表达情况,以确定相关研究的内参基因。方法:检测碱性磷酸酶(alkalinephosphatase,ALP)确定BMP9诱导的MSCs(包括C3H10、C2C12和MEF)向成骨分化;以real-timePCR分别检测0、1、3、5、7dGAPDH和β-actin的mRNA表达水平;以Westernblot检测GAPDH和β-actin蛋白。结果:(1)β-actin在BMP9诱导的MSCs成骨分化过程中mRNA表达水平逐渐升高,0d与5dβ-actin的mRNA表达量存在统计学差异(C3H10、C2C12和MEF的P值均为0.000,GAPDH的mRNA表达水平未见明显改变(P>0.05);β-actin蛋白表达量随成骨分化逐渐增加,而GAPDH蛋白表达未见明显变化。结论:在BMP9诱导的MSCs成骨分化过程中,GAPDH比β-actin更适合做内参。
|