自噬相关蛋白Atg5在BPA所致肝脏脂质沉积中的作用研究

目的：观察自噬相关蛋白Atg5是否介导双酚A（bisphenolA，BPA）所致的肝脏脂质沉积。方法：将HepG2肝细胞分为对照组、BPA不同浓度（1、10μmol/L）干预组、阳性对照组即200μmol/L油酸（oleicacid，OA）联合400μmol/L软脂酸（Palmiticacid，PA），分别给予上述不同干预24h。采用化学酶促-比色法定量检测细胞内甘油三酯（triglyceride，TG）含量，油红O染色观察细胞内脂滴沉积情况。Real-timePCR及Westernblot、免疫荧光方法检测在不同干预情况下HepG2细胞内Atg5的表达水平。结果：①不同浓度BPA干预后，HepG2细胞内TG含量均有不同程度的升高，其中10μmol/LBPA组升高具有统计学意义（0.197±0.033；0.094±0.014，P=0.031）；②油红O染色结果与TG定量一致。③Real-timePCR结果表明，与对照组相比10μmol/LBPA组Atg5mRNA表达并无明显变化（0.93±0.088；1.0175±0.0624，t=0.811，P=0.428）；Westernblot结果显示与对照组相比10μmol/LBPA组其蛋白表达明显减少（0.519±0.059；1，t=0.8101，P=0.000）；免疫荧光进一步检测发现，与对照组相比10μmol/LBPA组Atg5荧光小点数量明显减少。结论：自噬相关蛋白Atg5可能介导BPA所致的肝脏脂质沉积的发生。