乙型肝炎病毒复制对肝癌细胞Arid2基因表达的影响

目的：初步研究乙型肝炎病毒（hepatitisBvirus，HBV）感染及其复制对肝癌细胞中抑癌基因Arid2（AT-richinteractivedomain2）表达的影响。方法：采用携带HBV基因组1.1倍体的复制型重组腺病毒Ad-HBV1.1感染Huh7细胞，或者四环素诱导的HBV复制细胞模型HepAD38细胞，观察HBV瞬时或稳定复制细胞模型中Arid2的表达变化；进一步采用HBV各元件乙型肝炎病毒S蛋白（hepatitisBvirusSprotein，HBs）、乙型肝炎病毒DNA聚合酶（HBV-pol）、乙型肝炎病毒核心蛋白（hepatitisBviruscoreprotein，HBc）、乙型肝炎病毒X蛋白（hepatitisBvirusXprotein，HBx）的过表达质粒转染Huh7细胞，明确病毒自身编码蛋白对Arid2表达的调控作用。在上述细胞模型中，运用Southern-blot、ELISA、real-timePCR的方法验证HBV的感染与复制情况，通过RT-PCR、Westernblot检测肝癌细胞抑癌基因Arid2表达水平的变化。结果：HBV瞬时转染或稳定复制细胞模型中，Ad-HBV1.1感染的Huh7细胞mRNA和蛋白表达水平明显降低，Westernblot结果显示Arid2蛋白表达水平降低了46.10%（P<0.05）；在HBV稳定复制的HepAD38细胞中，Arid2蛋白表达水平降低了37.63%（P<0.05）。转染HBV4种病毒编码蛋白过表达质粒的Huh7细胞中，过表达HBs、HBx组较其他实验组Arid2表达水平明显降低，Westernblot结果显示Arid2蛋白表达水平在HBs组降低了54.55%（P<0.05），在HBx组降低了46.38%（P<0.05）。结论：HBV的感染和复制导致肝癌细胞中Arid2的表达水平下调，Arid2基因的表达与HBV复制水平呈负相关，其中HBs、HBx对Arid2的下调作用较明显。