鱼藤酮多克隆抗体的制备和残留分析方法

为建立鱼藤酮免疫分析方法,以鱼藤酮为原料合成4-{2-肼基}-4-丁酸(简称鱼藤酮腙琥珀酸半酯,RH-HS)半抗原,通过碳化二亚胺法(EDC)、活酯法(AE)将半抗原与牛血清蛋白(BSA)偶联制备免疫原Ⅰ、Ⅱ。将免疫原分别免疫BALB/c鼠获得相应的抗体Ⅰ和抗体Ⅱ,测定抗体冻干粉效价,分别为4.10×105和8.29×105。并进行抗原抗体的竞争抑制能力、特异性和鱼藤酮的添加回收试验。结果表明:抗体Ⅰ、Ⅱ对鱼藤酮最低检测限(IC20)分别为0.440？μg/mL和0.437？μg/mL。两抗体对吡蚜酮、克百威的交叉反应率均小于1.1%,抗体Ⅰ对4个与鱼藤酮结构相类似化合物的交叉反应率均高于56%,较抗体Ⅱ高。鱼藤酮的免疫分析技术(ELISA)与HPLC检测手段相比,在检测线性范围和灵敏度方面,两者差异不明显;在样品前处理方面,ELISA显示出快速、简单、有效的优点。