甘蔗花叶病毒CI蛋白在玉米韧皮部细胞中的免疫定位

为探讨甘蔗花叶病毒(Sugarcanemosaicvirus,SCMV)CI基因的功能,对CI蛋白进行了免疫定位。利用RT-PCR方法,扩增甘蔗花叶病毒北京株系(SCMVBeijingisolate,SCMV-BJ)CI基因部分片段,将其连接到表达载体pET-28a上,重组质粒pETCIF1导入大肠杆菌BL21(DE3)pLysS中。SDS-PAGE分析表明,经IPTG诱导,CI基因获得了高效表达。将融合蛋白纯化后免疫兔子获得特异性较高的抗血清,利用该抗血清,对健康玉米和受病毒侵染的玉米茎、叶脉和叶片进行免疫金标记,在茎和叶脉韧皮部筛管的细胞壁处有金颗粒。