内生解淀粉芽孢杆菌LP-5抗菌蛋白的分离纯化及特性

解淀粉芽孢杆菌BacillusamyloliquefaciensLP-5是一株对梨黑斑病菌Alternariaalternata具有抑制作用的内生细菌,其产生的抗菌物质主要是抗菌蛋白。为明确该抗菌蛋白的理化性质,采用盐酸沉淀、DEAE-52层析和SephadexG-100层析进行纯化,测定了所得抗菌蛋白对热、蛋白酶、紫外辐射及酸、碱的稳定性。结果表明:纯化的抗菌蛋白分子量为20.3kD,等电点为6.33。该蛋白对高温敏感,100℃处理30min,抑菌活性仅为对照的18.4%;对蛋白酶K和胰蛋白酶稳定,酶处理后的抑菌活性分别为对照的92.5%和88.9%;对紫外辐射稳定,照射12h后抑菌活性仍达对照的92.5%;对酸稳定、对碱敏感,pH13处理后抑菌活性下降为原有活性的74.1%。抑菌活性测定结果显示,该蛋白对梨黑斑病菌的孢子萌发和菌丝生长有明显抑制作用,可造成孢子萌发端泡囊化、菌体破裂、原生质外渗。