三种分子检测体系的比较及柑橘果园黄龙病监测

为了评价3种PCR分子检测体系对柑橘黄龙病(citrushuanglongbing,HLB)大田诊断效果,综合比较了常规PCR、巢式PCR和SYBRGreenⅠ荧光定量PCR(SGⅠ-qPCR)方法对柑橘黄龙病菌检测的灵敏度、特异性和准确度等参数,并用SYBRGreenⅠ荧光定量PCR和巢式PCR监测广西柑橘园疑似HLB样品425个,比较了2种检测体系的阳性检出率。基于CQULA04F/CQULA04R引物对的SYBRGreenⅠ荧光定量PCR的灵敏度可达10ag/μL;而巢式PCR灵敏度为100ag/μL,巢式PCR较常规PCR检测灵敏度高104倍。疑似样品HLB病原SYBRGreenⅠ荧光定量PCR和巢式PCR检出率分别为46.6%、40.0%。各检测体系的灵敏性、特异性、符合度依次为SYBRGreenⅠ荧光定量PCR>巢式PCR>常规PCR。研究表明,SYBRGreenⅠ荧光定量PCR可作为果园大规模HLB早期诊断和监测的首选,而在缺乏定量检测仪器时,巢式PCR也可用于HLB的检测,但需注意避免空气污染导致的假阳性。