芦笋茎枯病菌原生质体的制备及再生

原生质体的制备是真菌遗传转化的基础，为了解芦笋茎枯病菌Phomopsisasparagi的遗传转化体系，以芦笋茎枯病菌Pa1100为供试菌株，研究了细胞壁裂解酶、酶解时间、稳渗剂等对芦笋茎枯病菌原生质体制备的影响及稳渗剂对原生质体再生的影响。结果表明可制备芦笋茎枯病菌原生质体较为适宜的条件是：CM液体培养基中培养分生孢子3d，以1.5%裂解酶、1%崩溃酶和1.5%蜗牛酶为组合酶解液，33℃水浴酶解4.5h，以PBS（pH6.98）与1mol/LMgSO4混合液为酶解稳渗剂。含0.6mol/L蔗糖的PDA培养基较适合于芦笋茎枯病菌原生质体的再生。