马兜铃内酰胺I对肾小管上皮细胞的损伤作用

目的:了解马兜铃内酰胺I(ALI)是否导致肾小管上皮细胞损伤。方法:以体外细胞培养的人类近端肾小管上皮细胞系(HK2)为研究对象,以马兜铃酸I(AAI)为阳性对照,采用LDH释放试验检测ALI的直接细胞损伤作用;用相差显微镜、电子显微镜观察细胞形态变化,用流式细胞仪分析细胞DNA含量以及细胞膜磷脂酰丝氨酸(PS)表达水平,以了解细胞凋亡情况;采用ELISA法检测细胞培养上清液中细胞外基质成分纤连蛋白(FN)以及促纤维化细胞因子转化生长因子β1(TGFβ1)的分泌水平。结果:ALI(2.5～20mg·L-1)具有浓度依赖的直接细胞损伤作用;细胞形态、DNA含量及PS表达水平分析表明,ALI在上述浓度范围内能够导致HK2细胞凋亡,并能够导致HK2细胞分泌TGFβ1及FN。与AAI的作用进行比较发现:在相同浓度情况下,ALI的直接细胞毒作用强于AAI,但其导致细胞凋亡、TGFβ1及FN分泌的能力弱于AAI。结论:马兜铃酸的代谢产物ALI能够造成肾小管上皮细胞的损伤,作用与AAI相似。尽管其致损伤作用较AAI弱,但仍有可能是含马兜铃酸中药导致肾脏损伤及其纤维化过程的毒性成分之一。