天花粉多糖对人外周血单个核细胞的免疫活性作用

目的:建立天花粉多糖促人外周血单个核细胞(peripheralbloodmononuclearcells,PBMC)淋巴细胞增殖的方法,了解天花粉多糖对淋巴细胞增殖、活化作用,对T淋巴细胞亚群分群的影响和诱导产生TNF-α,IL-6水平的差异。方法:制备天花粉多糖提纯液。健康人PBMC作为药物筛选的靶细胞;采用MTT法测定不同浓度天花粉多糖(0.5,1.0,5.0,10.0,20.0,50.0mmol·L-1)的促人PBMC淋巴细胞增殖作用;采用流式细胞术和ELISA法分别检测药物作用后人PBMC中T淋巴细胞亚群(CD3+,CD4+,CD8+T细胞)的表达和诱导人PBMC分泌产生TNF-α,IL-6水平。结果:1.0~50.0mmol·L-1天花粉多糖对人PBMC具有明显促增殖作用(P<0.05);经5.0,10.0mmol·L-1天花粉多糖刺激后的人PBMC中,CD3+,CD4+,CD8+T细胞的含量明显高于对照组(P<0.05),1.0,5.0,10.0mmol·L-1天花粉多糖刺激人PBMC8h后,TNF-α,IL-6水平显著升高(P<0.05)。结论:天花粉多糖对人PBMC有明显促增殖和活化作用,不同程度地上调T淋巴细胞亚群中CD3+,CD4+,CD8+T细胞的含量,并可诱导人PBMC高水平分泌产生TNF-α,IL-6,为阐明天花粉多糖的免疫活性和作用机制奠定基础。