苦参碱诱导白血病TF-1细胞凋亡及对SALL4基因表达的影响

目的:探讨苦参碱(matrine,Mat)诱导急性髓性白血病M6型人红白血病TF-1细胞凋亡及对SALL4基因表达的影响。方法:将不同质量浓度(0.5,1.0,1.5,2.0g·L-1)的Mat分别作用于体外培养的TF-1细胞不同时间(24,48,72h),MTT检测Mat对细胞增殖的影响;流式细胞术(flowcytometry,FCM)测定细胞周期;AnnexinV和PI双染色法检测细胞凋亡;逆转录RT-PCR(reversetranscriptionPCR,RT-PCR)检测SALL4mRNA表达。结果:Mat(0.5~2.0g·L-1)作用TF-1细胞24,48,72h后均有增殖抑制作用(P<0.01),在该浓度范围内抑制率呈剂量和时间依赖,48h半数抑制浓度(IC50)为1.0g·L-1;Mat作用TF-1细胞48h后,与对照组相比G0/G1期细胞比例增加,S期细胞下降(P<0.01);流式细胞术检测细胞凋亡率分别为8.6%,11.21%,15.26%,17.63%,与对照组(5.05%)相比较,差异具有统计学意义(P<0.01);RT-PCR结果显示SALL4mRNA表达量与β-actin(内参照)表达量的比值,随Mat剂量增加而显著减小(P<0.01)。结论:Mat在一定浓度和时间范围内对TF-1细胞具有增殖抑制作用,其机制是使细胞发生G0/G1期阻滞;抑制SALL4基因的表达,诱导细胞凋亡。