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中国中药杂志 2011
复肾颗粒对人肾小管上皮细胞TAK1表达的影响及其机制探讨Keywords: 复肾颗粒,人肾小管上皮细胞,细胞增殖,肾纤维化,转化生长因子β激活激酶 Abstract: 目的:探讨复肾颗粒对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导下人肾小管上皮细胞(HK-2)增殖时转化生长因子β激活激酶(TAK1)表达的影响及其可能机制。方法:体外培养HK-2细胞,分为对照组,TGF-β1诱导组(5μg·L-1)、干预1组(TGF-β15μg·L-1+复肾颗粒100μg·L-1)、干预2组(TGF-β15μg·L-1+复肾颗粒500μg·L-1)、干预3组(TGF-β15μg·L-1+复肾颗粒1g·L-1)。培养12,24,48h以MTT法检测细胞增殖情况,ELISA法检测细胞上清IV型胶原蛋白(ColIV)含量,实时荧光定量PCR检测TAK1mRNA的相对含量,Western印迹法检测TAK1蛋白表达。结果:①TGF-β1组细胞的增殖及ColIV的表达显著高于对照组(P<0.05,P<0.01),复肾颗粒干预后细胞增殖和ColIV的表达显著低于TGF-β1组(P<0.05,P<0.01)。②TGF-β1诱导12h细胞TAK1表达开始上调,且各时间点表达量均高于对照组(P<0.01),复肾颗粒干预后,与同时间点TGF-β1组比较显著下调(P<0.01),尤以干预3组为甚。结论:在体外,复肾颗粒对TGF-β1诱导HK-2细胞增殖过程中TAK1蛋白及mRNA的表达有下调作用,其可能是通过激活肾小管上皮细胞某些抑制因子抑制TAK1转录和表达。
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