根癌农杆菌对枳壳遗传转化的影响因素

目的：建立一套根癌农杆菌转化枳壳的有效方法，为枳壳新品种选育、引入外源基因奠定基础。方法：以枳壳实生苗的上胚轴为材料，农杆菌菌株为ＥＨＡ１０１，含质粒载体ＰＧＡ４８２ＧＧ，质粒上插入了ＧＵＳ，ＮＰＴⅡ基因。结果：２０ｄ苗龄的外植体转化再生率较高；其感染前先进行２ｄ预培养，对转化有一定促进作用；外植体与农杆菌共培养时间以２～３ｄ为宜；乙酰丁香酮能较大提高转化效率，转化再生频率达２７．５％；外植体与农杆菌共培养后延迟２ｄ选择，抗性芽发生率有所提高。结论：通过探讨根癌农杆菌对枳壳遗传转化的影响因素，获得较高的转化再生频率，建立了有效的转化再生系统。