小檗碱对肝细胞核因子4α表达及葡萄糖激酶活性的影响

目的：观察小檗碱对小鼠原代肝细胞核因子4α(HNF4α)表达及葡萄糖代谢关键酶葡萄糖激酶(GK)活性的影响，探讨小檗碱治疗2型糖尿病的分子机制。方法：采用改良两步灌流法培养小鼠原代肝细胞，用不同浓度的小檗碱(0,1，3，10，30，100μmol·L-1)和1mmol·L-1二甲双胍干预24h后，采用RT-PCR方法检测HNF4αmRNA表达；采用Western-blot方法检测HNF4α蛋白的表达，同时检测GK的活性。结果：与阴性对照组相比，小檗碱在10，30，100μmol·L-1时能够明显促进HNF4αmRNA及蛋白的表达，二者同时在30μmol·L-1时达到最大值(HNF4αmRNA相对吸光度为0.48±0.20,蛋白相对吸光度为3.47±0.86，P<0.01)；在10，30μmol·L-1时明显上调GK活性，同时在30μmol·L-1时达到最大值(0.080±0.073，P<0.05)；而二甲双胍对HNF4αmRNA、蛋白的表达及对GK活性的影响则与阴性对照组无明显差异。结论：小檗碱改善糖代谢的作用可能与其调节肝细胞核因子4α的表达进而调节GK活性有关。