基于ITS序列的中国药用石斛及其混伪品的分子鉴定

目的：通过测定17种药用石斛的rDNAITS全序列，构建分子系统树，在分子水平对待检种进行鉴别，为石斛的分子鉴定提供依据。方法：采用改良的CTAB法提取石斛叶片DNA，PCR扩增rDNAITS区全序列，产物回收纯化后直接测序，运用Bioedit，MEGA4.0等软件分析石斛属植物的rDNAITS序列的特征。结果：建立了17种药用石斛rDNAITS区碱基全序列数据库，其中，ITS1的长度为228～234bp，GC量为45.7%～53.0%，变异位点167个，占总位点67.34%，信息位点106个，占总位点42.74%；ITS2长度为241～247bp，GC量为44.8%～55.7%，变异位点165个，占总位点66.27%，信息位点115个，占总位点46.18%。属间的遗传距离为0.295，石斛种间的平均遗传距离为0.142，种内各居群间的平均遗传距离为0.002。结论：利用17种石斛的全序列数据库及遗传分析软件，通过对待检种rDNAITS区进行序列测定，可以在分子水平对石斛不同种质进行鉴别，为石斛的分子鉴定提供依据。