磁珠富集法分离半夏微卫星序列

目的：利用磁珠富集法分离半夏微卫星序列，以开发半夏微卫星引物。方法：根据链亲和素磁珠和生物素特异结合的特性，将微卫星探针5′端生物素化后与链亲和素磁珠特异结合，用磁珠和探针的结合物与两端连接已知序列人工接头的半夏基因组DNA酶切片段杂交，洗脱未杂交DNA片断后，建立微卫星文库。以此为模板用人工接头序列为引物进行PCR扩增，产物直接克隆，经菌液PCR筛选后测序分析。结果：得到15条半夏微卫星序列，开发效率为93.75%。结论：结果显示这是一种快速而有效的微卫星开发方法。