珍稀药材小蔓长春花组织培养及长春胺含量的测定

目的:研究不同植物生长物质配比对小蔓长春花叶、茎、根愈伤组织诱导的影响,及各生长期无菌植株、愈伤组织中长春胺含量差异。方法:以小蔓长春花无菌苗的叶、茎、根为材料,采用正交设计实验研究2,4-D,6-BA,NAA对小蔓长春花愈伤组织诱导的影响。在无菌植株生长20,40,60d,愈伤组织形成高峰期30d,继代培养30d时,采用HPLC分别对其中的长春胺含量测定,实验数据进行统计分析。结果:培养基中添加的6-BA,NAA对小蔓长春花叶、茎、根愈伤组织的诱导、生长无显著影响,而2,4-D则影响显著。无菌植株生长20,40,60d时,长春胺分别为(0.015±0.003)%,(0.097±0.001)%,(0.113±0.06)%;诱导培养、继代培养至30d时,小蔓长春花叶、茎、根愈伤组织长春胺分别为(0.024±0.0025)%,(0.016±0.0015)%,(0.010±0.0015)%,(0.041±0.002)%,(0.019±0.001)%,(0.016±0.002)%。结论:诱导小蔓长春花叶、茎、根愈伤组织形成的最适培养基为MS+2,4-D1.0mg·L-1+6-BA0.5mg·L-1+NAA0.5mg·L-1。不同生长期无菌植株中长春胺含量差异显著,源于不同外植体的愈伤组织中的长春胺含量不同,其中叶诱导的愈伤组织长春胺含量显著高于茎、根产生的愈伤组织。