滴水珠原生质体的分离纯化与植株再生

以滴水珠的幼嫩叶片为材料,对影响原生质体分离纯化、培养及植株再生的因素进行了研究。结果表明:适合滴水珠叶片的酶解体系为13%CPW(细胞原生质体洗液)+1.0%纤维素酶+0.1%果胶酶,pH6.0,适宜酶解温度为25~28℃,酶解时间为4h;滴水珠叶肉原生质体纯化以上浮法蔗糖梯度离心效果最佳,以25%的蔗糖做梯度材料,500r·min-1离心10min;用于培养滴水珠原生质体的培养基为MS+0.5mg·L-16-BA+0.25mg·L-1NAA13%甘露醇,培养3d有细胞分裂启动迹象,30d左右形成愈伤组织,转移至MS+0.5mg·L-16-BA+0.25mg·L-1NAA固体培养基上增殖培养,并继代数次,5~6个月后愈伤组织可分化出芽并再生植株。