丹参含药血清对肝星状细胞Hh通路中SuFu和DYRK2表达的影响

观察丹参含药血清对瘦素刺激的大鼠肝星状细胞(hepaticstellatecell,HSCs)丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶抑制剂(SuFu)和双特异性酪氨酸磷酸化调节激酶2(DYRK2)表达的影响。清洁级SD大鼠(60只)给予丹参水煎剂、生理盐水、秋水仙碱,连续灌胃10d制备丹参含药血清。体外培养的肝星状细胞(HSCs),除空白对照组外,其余各组均予瘦素100μg·L-1刺激24h,各组含药血清干预后置于37℃,5%CO2孵箱中培养。24h后收集细胞,采用MTT法检测HSCs的增殖,分别采用RT-PCR和Westernblot法测定SuFu和DYRK2的表达情况。用瘦素刺激大鼠HSCs后,DYRK2mRNA和蛋白表达均明显升高(与空白组比较P<0.01),SuFumRNA和蛋白表达均明显降低(与空白组比较P<0.01或P<0.05)。抑制剂组(cyclopamine)、丹参含药血清、秋水仙碱组干预后,DYRK2mRNA和蛋白表达明显降低(与模型组比较P<0.01),SuFumRNA蛋白表达均明显升高(与模型组比较P<0.01)。在模型组的基础上加入Hh通路激动剂(purmorphamine)充分活化后,DYRK2mRNA和蛋白表达均明显升高(与模型组比较P<0.01),SuFumRNA和蛋白表达均明显降低(与模型组比较P<0.01)。用丹参含药血清干预激动剂组后,DYRK2mRNA和蛋白表达明显降低(与模型组比较P<0.01),SuFumRNA和蛋白表达均明显升高(与模型组比较P<0.01)。丹参含药血清可通过干预瘦素诱导的HSCs中SuFu和DYRK2的表达,进而影响HSCs的活化增殖。