葛根素通过调控活性氧对缺氧诱导的PASMCs增殖的影响

探讨葛根素(puerarin,Pue)对缺氧所引起的大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)增殖的影响,并探讨其机制是否通过调控活性氧来实现的。原代培养大鼠PASMCs,选用2~5代用于实验。利用体外噻唑蓝比色法(MTT)、蛋白免疫印记法、流式细胞、DCFH-DA荧光观察Pue对PASMCs增殖能力的影响。利用蛋白免疫印记法检测ROS是否参与Pue抑制PASMCs增殖的过程。实验分组为:常氧组、缺氧组、缺氧+Pue组、缺氧+Pue+Rotenone组、缺氧+Rotenone组。其中Rotenone为ROS阻断剂。结果显示,Pue对常氧条件下的PASMCs增殖无影响,可抑制缺氧引起的PASMCs增殖。在常氧和缺氧状态下Pue对PASMCs的肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达均无影响;可以使缺氧导致的细胞周期蛋白(CyclinA)、细胞增殖核抗原(PCNA)表达下调;DCFH-DA探针证明Pue能逆转缺氧引起的ROS含量升高。Rotenone与Pue均可抑制因缺氧诱导的HIF-1α,CyclinA,PCNA表达上调且存在协同作用。这些结果说明,Pue可抑制缺氧引起的PASMCs增殖,这一作用可能是通过调控ROS来完成的。