白头翁汤正丁醇提取物对热带念珠菌毒力因子的影响

目的:探讨白头翁汤正丁醇提取物butylalcoholextractofBaitouwengdecoction,BAEB对热带念珠菌(Candidatropicalis)毒力因子细胞表面疏水性、菌丝及生物膜形成的影响。方法:采用微量稀释法测定BAEB对热带念珠菌的最低抑菌浓度(MIC);XTT还原法测定BAEB对热带念珠菌生物膜抑制作用(SMIC80),Time-Kill法检测BAEB对热带念珠菌活菌数的动态影响;水-烃两相法测定BAEB对热带念珠菌细胞表面疏水性(cellsurfacehydrophobicity,CSH)的影响;荧光显微镜观察BAEB对热带念珠菌菌丝形态的影响;扫描电镜观察BAEB对热带念珠菌生物膜形态的影响;激光共聚焦显微镜检测BAEB对热带念珠菌生物膜荧光信号强度的影响;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测菌丝及生物膜相关基因UME6,NRG1,ALST3的表达量变化。结果:BAEB对9株热带念珠菌的MIC在64~128mg·L-1,对热带念珠菌生物膜的SMIC80为256~512mg·L-1,FLZ对热带念珠菌的MIC在1~1024mg·L-1,SMIC80为1024mg·L-1或以上,Time-Kill曲线显示256,512mg·L-1BAEB具有明显的杀菌作用,CSH实验显示128,256,512mg·L-1BAEB均能够降低其表面疏水性,SEM观察到512mg·L-1BAEB能够有效抑制热带念珠菌在硅胶导尿管上生物膜完整度,CLSM显示256,512mg·L-1BAEB可以明显降低生物膜荧光信号强度,qRT-PCR检测显示在256,512mg·L-1BAEB作用下,ALST3,UME6基因表达量显著下调,NRG1无明显变化。结论:BAEB可以抑制热带念珠菌细胞表面疏水性、菌丝及生物膜形成等毒力因子。