基于雌激素应答元件转录调节的药物筛选模型的建立

目的:建立靶向雌激素应答元件(ERE)的药物筛选模型,为筛选雌激素受体(ER)配体奠定基础。方法:构建重组报告基因载体pERE-TAL-SEAP,与对照载体pCMVβ瞬时共转染表达人ERα或ERβ的Hela细胞株,观察化合物对SEAP报告基因表达活性的影响。结果:雌二醇(E2)诱导表达人ERα或ERβ的Hela细胞株SEAP的表达,EC50分别为(80.58±8.51)pmol·L-1和(103.90±5.29)pmol·L-1,最大效应浓度为10nmol·L-1;金雀黄素(Gen)也诱导表达人ERα和ERβHela细胞株SEAP的表达,EC50分别为(39.38±2.26)nmol·L-1和(10.86±0.75)nmol·L-1;最大效应浓度为1μmol·L-1;E2和Gen诱导SEAP表达的最大水平较对照孔细胞高7～14倍。ER拮抗剂ICI182,780可完全抑制E2和Gen对SEAP的诱导作用。结论:利用此模型检测化合物诱导报告基因的表达水平可筛选和发现ER配体。