HPLC测定钩藤中钩藤碱和异钩藤碱的方法学探讨

目的:探讨钩藤中钩藤碱和异钩藤碱的HPLC含量测定方法。方法:采用RP-HPLC,对钩藤中钩藤碱和异钩藤碱的HPLC含量测定方法学进行考察,同时采用HPLC-ESI-MS研究钩藤碱和异钩藤碱在加热过程中的化学成分转化情况。结果:钩藤碱在0.064~5.100mg线性关系良好,精密度良好;当样品采用回流提取时,平均加样回收率87.51%~88.83%,提取回收率12.60%;当样品采用超声提取时,平均加样回收率99.48%~103.2%,提取回收率47.08%。异钩藤碱在0.064~5.110mg线性关系良好,精密度良好;当样品采用回流提取时,平均加样回收率107.9%~113.9%,提取回收率40.00%,当样品采用超声提取时,平均加样回收率97.00%~99.59%,提取回收率51.03%。质谱分析结果表明回收率不合格的原因是钩藤碱在提取过程中大部分转化为异钩藤碱,有一小部分转化为未知成分;异钩藤碱在提取过程中转化为钩藤碱、去氢钩藤碱、异去氢钩藤碱及22-O-β-D-glucopyranosylisocorynoxeinicacid4种成分。结论:HPLC测定钩藤中钩藤碱和异钩藤碱宜采用超声提取法,并应注意回收率问题。