芦丁完全抗原的合成鉴定及免疫原性分析

目的:合成中药活性成分芦丁的完全抗原并进行鉴定及免疫原性研究,同时建立快速检测芦丁的酶联免疫吸附(ELISA)分析方法。方法:采用高碘酸钠法制备芦丁完全抗原,用紫外扫描和SDS-PAGE的方法对其进行鉴定,以此抗原免疫健康雄性新西兰大白兔,制备抗血清。结果:紫外分析表明合成的完全抗原偶联比为13:1,SDS-PAGE显示完全抗原与牛血清蛋白或卵清蛋白相比后移了。免疫新西兰大白兔得到特异针对芦丁的抗血清,芦丁抗体的效价为1:4000。经方法学考察,灵敏度IC50为5.37mg·L-1,最低检测限为1mg·L-1,平均添加回收率为102%,批内和批间RSD均小于10%,抗体与其他类似物的交叉反应率小于1%。结论:成功的合成了具有较好的免疫原性的芦丁完全抗原,并成功的建立了快速检测芦丁的酶联免疫吸附(ELISA)方法。