玉米ZmCIPK31基因原核表达及启动子序列分析

与钙传感器类钙调磷酸酶B蛋白（calcineurinB-likeprotein,CBL）互作的蛋白CIPK（CBL-interactingproteinkinase）在植物特定的生长发育和应答胁迫过程中起重要作用。对前期研究得到的玉米ZmCIPK31基因构建原核表达重组载体，进行原核表达分析，转化重组质粒的大肠杆菌BL21菌株能够诱导出期望的目的蛋白。蛋白可溶性分析表明，它是可溶性的蛋白，通过淀粉树脂柱对其进行纯化，为下一步激酶活性分析提供了有活性的目的蛋白。同时，克隆了ZmCIPK31基因起始密码子ATG上游包括2189bp的启动子区段，顺式作用元件预测分析表明此区段不仅具有TATA-box和CAAT-box等启动子共有序列，还具有光应答、胁迫应答、发育相关、激素相关及其他功能未知的调控结构域。聚乙二醇（PEG）胁迫下，ZmCIPK31基因的诱导表达进一步表明其能够应答胁迫，且在地上部和根中的表达模式不同。