新模式植物短柄二叶草SGT1和RAR1基因沉默和蛋白纯化载体构建

短柄二叶草（Brachypodiumdistachyon）作为一种新型的模式植物，已成为当前研究热点。其具有基因组小、生长周期短、生存环境简单和容易人工转化等重要生理和遗传特性，被认为是一种潜力巨大的人类研究能源和粮食作物的重要模式植物。2010年国际短柄二叶草协会（IBI）顺利完成其全基因组测序。SGT1和RAR1基因是高度保守的并与植物抗病功能紧密相关的两个重要基因。本文采用Gateway克隆技术对此二基因进行了高通效基因沉默表达载体的构建（ihpRNA）。阳性克隆载体经PCR、酶切和测序鉴定。为进一步研究SGT1和RAR1互作蛋白及其功能，采用该克隆技术将此二基因cDNA全长克隆至串联亲和纯化（Tandemaffinitypurification,TAP）蛋白表达载体pEarleyGate205中，为纯化SGT1和RAR1及其互作蛋白提供了基础。正确的阳性克隆载体经农杆菌介导转化至短柄二叶草Bd21获得转化株，以期进一步研究SGT1和RAR1基因及蛋白互作对于短柄二叶草抗病功能的影响。这些数据将在另文中发表