农杆菌介导的大豆子叶节非组织培养遗传转化体系优化

本研究以GUS基因在子叶节区的瞬时表达为依据，通过探讨影响农杆菌转化效率的因素，优化了大豆子叶节非组织培养遗传转化体系；利用该体系对冀豆16号进行Bar基因的遗传转化，并使用针刺法对转基因植株进行草铵膦筛选。结果表明，侵染液中附加3%蔗糖、OD6OO=0.6、以脱脂棉作为菌液附着介质同时不添加表面活性剂SilwetL-77、侵染1次的GUS阳性率最高达到62.13%。草铵膦抗性植株经PCR检测获得T0代阳性植株10个，转化率为2.5%。经PCR和RT-PCR鉴定共获得3株T1代阳性植株，初步证明目的基因已整合到大豆基因组中。