黄瓜抗黑星病相关基因的差异表达分析

以抗黑星病黄瓜材料HX1为试材，接种黑星病菌（Cladosporiumcucumerinum）2h、8h、20h、32h和72h的叶片作为试验方（Tester），相应的未接种叶片作为对照方（Driver），利用SSH技术，构建了黑星病菌侵染初期的正向和反向cDNA-SSH文库。用巢式引物PCR检测插入片段，获得了200个阳性克隆，通过测序，除去重复序列，共得到105个UniqueESTs。与非冗余蛋白数据库进行BLASTx比对，结果显示，17条ESTs未找到同源序列，88条非重复序列和已知基因的同源性较高，占全部ESTs序列的83.8%，其中86条ESTs与非冗余蛋白数据库已知功能的蛋白具有高度的相似性。结合高密度点阵膜杂交差异筛选，阳性率为75.0%。经初步分析这些序列的功能，差异表达的ESTs功能涉及能量和基础代谢、信号转导、蛋白和核酸代谢、光合作用及逆境中特异表达的基因等方面。为研究黄瓜抗黑星病基因提供了依据。