苹果砧木SH40MdNCED1基因克隆与表达分析

以苹果砧木SH40（Malusdomestica?MalusHonanensis）为试材，采用RT-PCR结合RACE技术从苹果茎尖中克隆得到一个脱落酸（ABA）代谢合成关键基因：9-顺式-环氧类胡萝卜素双加氧酶（NCED）基因cDNA序列全长，命名为MdNCED1，其全长2179bp,编码606个氨基酸。该基因在GenBank登录号为KC816734。氨基酸同源性分析表明，MdNCED1与已报道的其他植物物种的氨基酸序列具有63.7%-93.0%的相似性。通过构建MdNCED1基因的原核表达载体pDEST15-MdNCED1，转入大肠杆菌（DE3），用IPTG诱导。SDS-PAGE分析表明，MdNCED1基因在大肠杆菌中被诱导表达蛋白质分子量与预期结果一致。荧光定量结果表明，MdNCED1基因在SH28、M26、SH40及其嫁接品种“嘎啦”的表达趋势均呈先上升后下降的过程，同时与其矮生程度呈正相关。