马铃薯茎尖超低温保存流程TTC活力响应

以马铃薯栽培种“呼自83-213”无菌试管苗茎尖为材料，通过开展2,3,5-氯化三苯基四氮唑（TTC,2,3,5-Triphenyltetrazoliumchloride)茎尖活力染色关键因素研究，优化了马铃薯茎尖TTC活力染色条件，确定了适合的染色温度为40℃，染色时间2h。利用优化的TTC活力染色条件，对马铃薯茎尖小滴玻璃化超低温保存关键步骤处理茎尖进行TTC活力观察。研究发现：经蔗糖预培养（MS培养液添加0.3mol/L和0.5mol/L蔗糖）的茎尖与新鲜茎尖一样就，均保持高活力；经PVS2处理后茎尖表现时空特异性活力丧失和存活，分生组织和叶原基中间区域仍保持较高活力。通过对茎尖TTC活力染色面积测定，发现当茎尖TTC活力染色面积比≥0.4时，TTC活力染色与恢复培养存活率呈极显著正相关(P<0.01)。