叶面喷施尿素对葡萄氮代谢相关基因表达的影响

本研究利用VitisEST数据库中EST序列片段结合RT-PCR方法克隆了与氮代谢相关的硝酸盐还原酶（NR），亚硝酸还原酶（NiR），谷氨酰胺合成酶（GS），谷氨酸脱氢酶（GDH）和天冬酰胺合成酶（AS）的基因，并对它们进行亚细胞定位分析。同时，采用半定量RT-PCR和荧光定量PCR法研究葡萄叶面喷施不同浓度尿素后5个基因的表达变化。结果表明，5个基因在葡萄幼叶中的表达水平显著高于老叶，说明叶面喷施尿素以喷布到幼叶对5个基因的表达水平影响显著；5个基因在不同时间段的表达水平差异不一致，但表达水平均高于对照，以0.3%和0.5%浓度的尿素对其影响明显；适当提高尿素水平既能提高氮代谢基因的表达水平，又能提高果实大小等果实指标，使其达到同步增加。喷施尿素6h后，GS的表达量上升幅度明显高于其它基因，而NR在喷施尿素后48h内一直保持着比较高的表达水平；NiR、AS表达量的变化趋势分别与NR、GS相一致，并且NR﹥NiR，GS﹥AS。