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南方水产科学 2014
嗜水气单胞菌与温和气单胞菌的lamp检测方法的建立DOI: 10.3969/j.issn.2095-0780.2014.05.002, PP. 8-16 Keywords: 环介导等温扩增技术,嗜水气单胞菌,温和气单胞菌,实时浊度法,检测 Abstract: 利用环介导等温扩增技术(loop-mediatedisothermalamplification,lamp)分别建立嗜水气单胞菌(aeromonashydrophila,ah)与温和气单胞菌(a.sobria,as)的快速检测方法。针对嗜水气单胞菌pilin基因、温和气单胞菌zipa基因设计特异性lamp引物。在恒温条件下利用实时浊度仪对2组引物进行特异性和灵敏度试验,并以琼脂糖凝胶电泳和核酸染料颜色变化对扩增结果进行判定。结果显示,lamp实时浊度法能够特异地检测嗜水气单胞菌和温和气单胞菌,最低检出限分别为46fg?ml-1和320fg?ml-1,是普通pcr方法的104倍和102倍;并能应用于已知临床样品检测。该研究建立的嗜水气单胞菌与温和气单胞菌lamp快速检测方法具有高效、特异、灵敏的特点。
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