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南方水产科学 2010
哈维氏弧菌感染的杂色鲍全组织均一化cdna文库的构建DOI: 10.3969/j.issn.1673-2227.2010.05.006, PP. 37-42 Abstract: 文章提取了哈维氏弧菌(vibrioharveryi)感染的杂色鲍(haliotisdiversicolorreeve)总rna,采用smart方法合成双链cdna,并用双链特异核酸酶进行均一化处理。割取0.5-1.0kb和1.0-3.0kb的片段分别连接pdnr-lib并转化大肠杆菌(esherichiacoli),最终构建2种片段大小的杂色鲍全组织均一化cdna文库。2文库库容均在2.5×105cfu·ml-1左右,pcr检测阳性重组率为100%。随机挑取200个克隆测序,获得高质量est序列174条。组装后得到149条unigenes,冗余率为14.37%。序列注释结果表明,有39条unigene序列与已知基因高度相似。综上所述,文章所建cdna文库质量良好,可以满足后续研究工作的需要。
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