罗非鱼组织内无乳链球菌实时荧光定量pcr检测方法建立

为建立一种罗非鱼组织内无乳链球菌（streptococcusagalactiae）的定量检测方法，以无乳链球菌cfb基因为靶标建立了taqman荧光探针实时定量pcr方法，并对该方法的特异性、敏感性及实用性进行了验证。应用建立的方法检测无乳链球菌标准菌株和阳性菌株均为阳性，阴性对照菌株均为阴性；无乳链球菌基因组dna最低检测质量浓度为3.42×10-7ng？μl-1，每个反应体系检测下限低于10个细胞；人工感染罗非鱼肝、脾、中肠和肾组织样品无乳链球菌检测结果均为阳性，组织样品每微克dna可检测到无乳链球菌细胞数量分别为2.95×103个、2.45×107个、2.34×103个和4.54×104个，对照组为阴性。结果表明建立的罗非鱼组织内无乳链球菌实时荧光定量pcr检测方法具有准确性高、特异性和敏感性强等特点，可对罗非鱼组织内无乳链球菌进行快速定量检测，可用于罗非鱼无乳链球菌病的监测与预防。