红肉脐橙番茄红素β-环化酶基因的克隆及在大肠杆菌中的功能表达

以'红肉脐橙'（citrussinensisosbeck'caracara'）果实中分离的mrna为模板，经rt-pcr扩增到约1.6kb的番茄红素β-环化酶（lycopeneβ-cyclase，lcyb）cdna片段。序列分析表明，该cdna长1654bp，包含两个转录本lcyb1和lcyb2，最大开放读码框均为1512bp，可编码504个氨基酸。通过pcr方法获得红肉脐橙lcyb1和lcyb2cdna编码区全长，构建了lcyb1和lcyb2的原核表达载体pet-citlcyb1和pet-citlcyb2，并通过颜色互补试验证实表达的融合蛋白6×his-lcyb1和6×his-lcyb2均可将番茄红素转化为β-胡萝卜素。