番茄dxs基因的克隆及在大肠杆菌中的颜色互补

用rt-pcr(反转录-聚合酶链式反应)的方法从番茄中克隆到5-磷酸脱氧木酮糖合成酶(deoxyoxylulose-5-phosphatesynthase,dxs)基因编码区(记为ledxs),并构建了ledxs原核表达载体ptrcledxs。将携带番茄红素生物合成途径上香叶基香叶基焦磷酸合成酶(geranylgeranylpyrophosphatesynthase,crte),八氢番茄红素合成酶(phytoenesynthase,crtb),八氢番茄红素脱饱和酶(phytoenedesaturase,crti)3个关键酶基因的原核表达载体pac-lyc转入大肠杆菌xl1-blue。将ptrcledxs转入该重组工程菌,获得番茄红素工程菌。将该菌用于构建颜色互补平板,并进行发酵培养以检测番茄红素表达量。颜色互补平板上的菌斑呈现鲜艳的红色。经过21h的培养番茄红素的产量达605.25μg·l-1。结果显示:ledxs能明显推动类胡萝卜素途径向番茄红素合成的方向流动。