羽衣甘蓝中一个突变型肉桂酸-4-羟化酶基因的克隆及分析

以羽衣甘蓝为材料,克隆了全长2431bp的肉桂酸-4-羟化酶基因boc4h。它有两个内含子,mrna为1715bp,编码一个481个氨基酸的推导蛋白,与其它植物c4h有广泛同源性。它含有细胞色素p450保守域和特征基序,如血红素结合域、e-r-r三联体、含t的结合槽基序、酶正确定向必需的铰链基序。boc4h具有c4h/cyp73a5的大部分特征性底物结合位点基序(srss)和酶活性位点残基,但与拟南芥等植物c4h相比其编码区3′发生了c2242单碱基缺失和相应移码,导致其蛋白c-末端缺失/变异了36个残基,srs6基序和其上的活性位点残基也相应缺失,因此boc4h可能无功能或活性低。boc4h为膜蛋白,可能定位于内质网,其二级结构主要为α-螺旋和随机卷曲。swiss-model不能预测出其三级结构。甘蓝中存在一个至少由5个成员构成的c4h基因家族。