小菊悬浮细胞培养与植株再生研究

以小菊‘七月红’品种为试材,进行了细胞悬浮培养及植株再生诱导的探讨。结果表明,ms+1.0mg·l-12,4-d+0.2mg·l-16-ba培养基适合从试管苗茎段有效诱导生长迅速、质地疏松的愈伤组织。获得的愈伤组织在ms+0.5mg·l-12,4-d+0.2mg·l-16-ba液体培养基中振荡培养,建立细胞悬浮培养体系。悬浮细胞的生长曲线呈上升的半抛物线型,细胞生长大致分缓慢生长期(0～2d)、对数生长期(2～10d)和停滞期(10d以后);随着悬浮细胞生长,培养液ph值迅速下降。悬浮细胞固液双层培养表明,在培养基ms+0.2mg·l-1kt+0.2mg·l-12,4-d上植板率最高;4℃低温2h处理能促进悬浮细胞生长,提高植板率;随着继代次数增加植板率呈下降趋势。培养1个月后,形成了直径约0.2cm的愈伤组织,将其转到ms+2mg·l-16-ba+0.1mg·l-1naa培养基后,继代4次,分化后出芽;分化芽在培养基ms+0.5mg·l-1naa上诱导生根,形成小植株。