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园艺学报 2006
高羊茅抗真菌病基因转化的研究, PP. 1275-1280 Abstract: 通过农杆菌介导法将双价载体(含抗真菌病的几丁质酶基因chi和β-1,3-葡聚糖酶基因glu)导入高羊茅愈伤组织细胞内,建立了高羊茅的农杆菌转化体系,获得了抗真菌病的转基因高羊茅植株。在转化过程中,确定了卡那霉素(kan)筛选剂的浓度以200~300mg/l为宜,联合运用羧苄青霉素(carb)与头孢霉素(cef)作为抗菌素能得到好的脱菌效果;农杆菌的几种共培养方式对转化频率的影响表明,共培养基上垫一层滤纸,愈伤周围滴加浸染液,恢复培养1周后用甘露醇和抗生素液洗涤,是一种好的转化方式。对转化植株进行pcr分析和分子杂交及禾谷镰刀菌挑战接种,发现转化植株有高阳性率及抗真菌能力。
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