墨兰组织培养结合化学处理脱除建兰花叶病毒(cymmv)的研究

对墨兰原球茎顶端分生组织培养结合化学处理脱除建兰花叶病毒(cymmv)病原的效果进行了研究。取1～2mm大小的墨兰原球茎顶端分生组织,经0,20和40mg·l-1的三氮唑核苷浸泡15min处理和继代培养,诱导再生植株。rt2pcr检测表明:从带病叶样提取的rna经反向转录和pcr扩增反应,在琼脂糖凝胶电泳中检测到长为767bp的cymmv病原特异扩增产物,而健康墨兰叶样中未检测到该扩增产物。单纯利用原球茎顶端分生组织培养获得的试管苗,脱毒率为72.9%;原球茎顶端分生组织经过20mg·l-1的三氮唑核苷处理,可以获得100%的无病毒苗。虽然三氮唑核苷处理造成原球茎顶端分生组织细胞一定程度的伤害,但经过5～6个月的培养,分生组织能恢复生长,不定芽能有效地增殖,并获得了再生植株。当三氮唑核苷处理浓度为40mg·l-1时,原球茎的顶端分生组织出现透明和褐变现象,细胞活力难以恢复。