玻璃化法超低温保存柑桔茎尖及植株再生

采用玻璃化法对柑桔茎尖的离体超低温保存进行了研究。约10mm长的柑桔茎尖于含5%二甲基亚砜(dmso)的培养基上预培养3d,切取2～2.5mm长的茎尖,室温下60%玻璃化溶液2(pvs2)装载20～30min,然后用pvs2于0℃处理50～60min,换入新鲜的pvs2,迅速投入液氮中,24h后在40℃水浴中迅速化冻,再用1.2mol/l蔗糖培养基洗涤2次,接种于含ba1.0mg/l的mt培养基上,26℃暗培养1周后转于正常光下培养。枳壳茎尖超低温保存后用氯化三苯基四氮唑(ttc)法检测,成活率为100%,培养再生率达到90%,再生后的苗能正常生根,与对照没有形态上的变异,移栽可成活。